T Ạ P CHÍ KI 1 0 A HỌC. BẠI HỌC T O N G I I ỢP HÀ NỘI s ố 4, 1987
T I N H S Ạ C H C H Ấ T K Ì M H Ã M T R I P X 1 N C H Ủ Y Ế Ư C Ủ A H Ạ T MƯỚP Đ Ẳ N G ( M O M O R D I C A C H A R A N T I A L . ) M C T I - I V ,
VÀ MỘT V À I TÍNH CHẮT CỦA NÓ
P H A N T l ' A N N G H Ĩ A , P H Ạ M T R Â N C H Ả I T r o n g Các c ô n g t r ì n b c ô n g b ố ở Vi ệ t N a m gal l đ â y [10, n j c l i ú n g t ôi đ ã g i ới 1IŨỘU t *I1I t ắ t v a i ’ t r ò v à t r i ề n v ọ o g ứ n g d ự n g c ù a c á c c hấ t k i m hãn? t r i p x i n ( I I , t à ô h t ử h ạ t b ằ u bi. K é t q u ả I i g h i è n c ứ.1 đ i ề u t r a h à m l ư ợ n g TI ở h ạ t c ú c c â y t h u ộ c h ọ b h u l)t ( C u c u r b i t a c e a e ) t r ồ n g p h ỗ b i ế n ơ n ư ớ c ta |1 I], c b o i h / 5 ) bạ l m i r ơ p đ ẳ n g { M o m o r d i c a c h a r a n t i a ) t h u ộ c l o ạ i g i à u c á c r h ẩ t n à y Vi v ậ y c h ủ n g t ôi đ à u ố n
h à n I n g h i ê n c ừ u k ỹ h ơ n t h à n h p h ù n , t í n h c h ẵ t r i c u a c h ú n g .
B ú n à v s ẽ t r ì ill b à y c á c k ế q u à n - ị h i í n c ứ u p h i r ơ n í ? p h á p t i n h s ạ c h m ộ t T i .< h ù y ế u c ùa h ạ ' niưỞỊ) đ ằ n g ( MC T i —IN)'
N g u y ê a l i ệu v à p h ĩ ơ n g p h á p : N g u y ê n l i ‘u :
H ạ t m ư ở p đ ẳ n g l ấ y t ừ v ư ờ n g i ố n g m ư ớ p đ a i ì g ô Đ ô n g d ư . Gia L â m , Ilà n ộ i
l i / u •
P r o t e i n d ư ợ c x á c đ ị n h t h e o Ị ) h ư ư n g p h ấ p L o w r y [ 5 ] . H o ạ t d ỗ c ù a t r i p x i n d . i ợ c x á c đ ị n h t h e o p b ữ ơ n g p h á p A n s o n cải t i ến Ị 1 1] d ù n g c a / e i n l à m c ơ c h í n ò n g đ ộ cuẲi c ù n g <>ủ c a z e h i I r o n , hf t n h ạ p p h á n irnR v ớ i e n z i m ả 0 6 % đ • 1 p h S t p h á t 0 , 1 M , pH 7,1», n h i ệ t đ ộ 3:>.;>°ù t h ờ i ííiân t á c d ụ u ; : là 20 phút Đ ề x á o đ ị n h b o a t đ ộ k ì m h â m t r i p x i n ( r i A ) . ủ t r i p x i n v ớ i ch át k ì m h à m t r o n g 10 p lút. Sấu d ỏ x.\c d i n i i h a l t i s i r i p x i n . H o ạ t đ ộ k ì m h à m t r i pxi r . là h i ệ u s 6 h o ạ t đ ộ e n z i m k h ; CO v à k l o n g CO c h i t k i t n h a m . M ộ t d y n vị 1 1A O u ) là Jư<?n S c h 1 t kini h là 11 g i ả m Õ0/O h o ạ t đ ộ c ù a 2 ing tri pxl n.
Đ i ệ n di t r ô n p o U u c r y l a m i d 7 , 5 % . p l i 8 , 3 i h e o p b ư a n g p h á p c ùa B a v i s [ 1 1 . đ ề p h á t h i ệ u CA* b ủ a g p r o t e i n , n h u ộ m gel TỚi a m i d o d e n 10B 1[% r o n g a xít a xe tic 7%. l ằ y m&ũ b i n g a x í t a x e t i c 7 % Đ ề x ả c đ i n h c á c y ù n g c ò h o ạ t l í n h k ì m hãm i r i p x i n trên c ột g e l sau k h i c h ạ y đ i ệ n đi. c ộ t gel k h ô n g n h u ộ n nià c j t r w n h c á . - đ ĩ ậ â dàl 0.1 c ũ . d á n ì n á t g e i v ớ i 1 0 01*1 d u n g dịch đ ệ m p h ỏ t p .ảt 44
( 0. 1M p H 7,6, l á y m ộ t l ư ợ n g n h ỏ d ị c h t r o n g , p h á t b i ệ n TI A b á n g p h ư ơ n g pbắt p I k h u y ẽ c b t á n t r ê n đ ĩ a t h ạ c h cỏ c h ứ a 0,1 % c a z e i n , p l ỉ 8,1 [ 4 Ị.
X á c ( l ị n h t r o n g l ư ợ n g p h á n l ừ bầtìịị p h ư o n g p h á p s ốc k v c ộ t g e l S e p h a d e x ( G — 75 ( 1 , 3 5 X 135 c m ) c â n b ằ n g v ổ i d u n g d ị c h đ ệ m p h ỗ t p h i t OtOGM, p H 7, 0 cố c ^ h ử a N a C I 0.1M. C ấ c p r o t e i n c h u ấ n đ à d ù n g : a l b u m i n h u y ế t t h a n h b ò ( t r ọ n g ỉ t v ợ n g p h ả n t ử 67.000), k i m o t r i p x i n o g e n A (25. 000), x ỉ ỉ o c r o m C (12. 300) , c h ấ t k i m h i 8 m K u n i t / c ủ a đ ậ u t i r a n g (20.000), I*hất k i m h à m B o w m a n —Bi r k c ủ a đ ạ o t i r ơ n g (( 8. 000).
T á c h c h ố t kì rn h à m t r i p x i n ( TI ) t ừ hạt m i r ỏ p d ắ n g : hạI n g h i ê n m ị n , <*hi< t b ) â n ^ d u n # d ị c h đ ệ m t h e o tỷ lệ 1:5 ( t r ọ n g l ư ợ n g / 1 b è t í c h ) , k h u ấ y ờ n h i ệ t đ ộ p h ỏ ĩ ịị t i r o n g 3 i ) p h út , ỉi tâ m Ihu lẫy d ị c h t r o n g , sắ'ĩ kỷ q u a c ộ t SP — S e p h a đ e x 2.%
t t h u đ ỉ n h h o ạ t đ ộn í ( c h í n h ( MC T I - I V ) , s ắ c k ý q u a cẠt Se p h a r i e x G — 75, t h u d i ỉ n h h o ạ t đ ộ n g , s ắ c k ý ái l ự c q u a cột t r i p x i n - S e p l i a r n z a 4B (1. 5 X 7 c m ) í h e o p i h ư ơ n g p h ố p đẵ g h i t r o n g [ 3 ].
K t l q u ả ưà th&o l u ậ n
T h ă i n d ò d i è a k i ệ n e h ỉ é t r ú t T I t ừ h ệ t m ư ớ p đ ắ n g
Đ ỉ c h i ẽ l r ủ t T I t ừ h ạ t b ằ u bl, c ủc c ò n g ỉ r ì n h n g h i é n c ú u t r ư ớ c ílAv [3, r , ỖS, 10, 1 2 ] đ d u d ù n g d u n g d ị c h đ ệ m a x ẻ t a t n a l r i . T u y n l i i é n khi s ử d ụ n g m ộ t l ư ợ n g
l í ớ n d u n g đ ị c h đ ệ m n à v g ặ p k h ó k h á n , Y l v ậ y c h u n g t ò i đ ẵ c h ọ n c ố c d u n g d ị c h
d ỉ ỗ t i m h ơ n . B ả n g 1 c h o t h á y k h i d ù n g d u n g d ị c h HC1 đ ề c h i ế t r ú í Tỉ , t ò n g h o ạ t ơ t ộ t r o n g đ ị c h c h i ể t t u y c ổ ít h ơ n khi d ù n g d u n g d ị c h đ ệ m a x e t a t n h ưng - 1 o ạ t đ ộ n g r r i ê n g ( H B R ) c ủ a n ỏ l ại l ớ n h ơ n H B K c ủ a d ị c h c h i e t b ằ n g đ ệ m a x e í a t g ầ n l , 5 I j n Kết q ú ầ s ấ c kỹ q u a cột S e p h a d e x G - 75 ( h i n h l a , b, c) c h o t h a y , s ắc M đ ò ccủa cả 3 d ị c h c h i ế t t u y c ỏ dạn<* c h u n g g i ố n g I h a u : t đ ỉ n h p r o t e i n e l i í n h đ ư ự ( ' rrút x u ố n g ò c á c ( h è t í c h r út g i ố n g n h a u ; ỉy c ả 3 d ị c h c ì r ẽ ỉ đ ề u ci J c ỏ 1 ĩ n h h o ạ t đ t ộ n g t ậ n ( r u n g ỏr v ù n g t h e t í c h 1 lit t ừ 1 6 5— 2 0 0 i n l . T u y n h i ê n IrtMi L i n h l c c á c ủ ỉ ỉ n h p r o t e i n k h ò n g cố h o ạ t t í n h ( đ ỉ n h I. II, IV) đ ẵ bị g i â m r õ r ệ t , d o (16 li lệ T Ĩ I A / m g p r o t e i n ( H D R ) c ủ a duĩìịỊ d ị c h chiốL lỉC.l l à l ớ n h ư n c ả . I l a n n ử a , đ ỉ n h I n o ạ l đ ộ n g t h u đ ư ợ c s a u khi s ắ c k ý ( Ịua c ộ t s e p h a d e x 0 —75 ờ h i n h l c cũ n ịi c ỏ H Đ R c a o n h á t ( b ả n g 1). Kỗt q u ả ( r ê n c h ừ n g t ỏ c ỏ the* s ử ú ụ n g H(*l đ ề cl ì ỉ ẽt r ú t TTI, đ i è u n ấ y c ó ý n g h ĩ a t h ự c t i e n r o r ệ t .
Đề s ơ b ộ t i m h i ề u t r ọ n g lưtTĩig phAn t ử c ủ a c á c T í h ạ t m ư ở p d ă n g (MC T I ) đ t ẫ c h o c á c p r o t e i n c b u ằ n c ỏ t r ọ n g l ư ợ n g p h ồ n tfr đ ẵ bi ết q u a c ột S e p h e d e x ( 5 — 7 5 ỉr n h ữ n g đ i ? u k i ệ n g i ố n g n h i r trỏĩ ì, x á c đ ị n h t h ? t í ch r ú t ( Ve ) c ủ a ĩĩìỗỉ p ) r o t e i n . Kẽt q u ả c h o t h ấ y , t ãt cã p r o t e i n c b n ằ n , k e cả c h á t kl ni b n m l i o w i n a n - í B i r k từ đẠu t ư ơ n g là p r o t e i n c h u a n c ỏ ‘ r ọ n g l ư ợ n g p h a n tử í h ấ p lihftt (8 0 0 0 ) C ĩ ữ n g đ ư ợ e vủì x u ố n g t r ư ớ c r ỉ n h TI A c ù a hạt m ư ó r p đ ắ n # . Do đ ỏ , cổ t h ề két l u ậ n r -ằ n g c ả c MC TI có t r ọ n g l i r ơ n g p h â n t ử bỏ h ơ n 8 0 0 0 Da . Nế u l ỉ n h t h e o đ ồ t h ị c : h u a n ( h ì n h 2) t hì I r ọ n g l i r ợ n g p h à n t ử c ủ a c ố c MC 1 i ĩ i ằ m I r o n g gi ởi h ạ n t ử 2 2500- 60 1: 0 Da, n g h ĩ a là t l ni ộc n h ổ m T I p h â n t ử thít]) n h ư n h i ỉ u T I ctiỉi c á c h ạ t t o à u hi k h á c đẫ đ ư ợ c c ô n g bổ [ 2 , 3, 6, 8. 9, 12 j. TÌ v ậ y đă t i ế n h à n h l i n h s ạ c h MC ' i n d ự a t h e o c á c p h ư ơ n g p h á p đ ã đ ư ợ c d ù n g I r ư á c đ á y
Đ i ệ n đi t r è n g e l p o l j r a c r i l a m i t 7.5% ờ pH 8,6 t h e o c h i é u từ à m đ ế n d ư a n g , tiit «ố c á * đ l a b từ MCTI - LI đ ễ n MC.TI - I V (leu t h o 1 b ă n g p r o t e i n ( b i n h 4 a ) . T u y
H ì n h 4
Diện di trèngel poliacrilamit à pH ' p^*
8,3 các chẽ phẫm TI của hạt mướp đẳng.
ta. Điện di từ 0 —* ©
A —Dịch chiẽl HCI của hạl mưởp
<ỉẳng;
B - M C TI —II: c - MC TI - IU.
1) - MCTI - IV. *
4b. Điện di lừ © - * 0 :
®
A) Dịch chiết HCI của hạt mưAp
< I ắ n g ;
D) MC T l - I V ; E — Dinh protein I cùa MC u - I V sau khi qua cột sephadcx G — 75.
G) Đủih protein II ( l i G) của MC TI — IV sau khi qua cộí Sepheđcx (G—-75}
H) MC TI — IV sau khi qua cột tripxin - Sepharoza 4B.
n h i ê n k b i x k c đ ị n h T I A, c h ĩ c ó b ă n g p r o t e i n c ủa — II Tồ — JI1 c ó hoflU l i n h k i m i,ỉun tripxi n. Cáo băng n à y c ó đ ộ d i đ ộ n g g i ỗ n g n h a u Yố c ũ n g ứ n g v ớ i 1 b ă n g p r o t e i n c ố h o ạ t đ ộ k i m hẵra t r i p x i n c ủ a địc h t r ư ớ c k hi l ỏ n c<t ( c ộ t A, h ỉ n h 4a).
MGTI — IV tuy c ó 1 b ă n g p r o t e i n n h ư n g băng n à y c ũ n g n h ư c ố c đ o ạ n cắe khảo t r ề n c ột g e l l è u k h ố n g c ó h o ạ t t i n h k i m h a m tri pxi n. Khi đ i ê n đi v ở i c á c đ i è a k i ệ n n h ư ỉ r ế n n h ư n g t h e o c b i è u n g ư ợ c lại l ừ d ư ơ n g đ ế n â m , MCTI — II c ũ n g n h ư M C T I - 111 khÔDg c h o b ă n g p r o t e i n n à o và c ũ n g k b ổ n g c ó h o ạ t l í n h . N g ư ợ c lại MCTI — IV c ó 2 b ă n g p r o t e i n , t r o n g đỏ b ă n g di đ ộ n g n h a n h h a n c ó h o ạ t tính k i m h3t n t r i p x i n ( c ộ l D, h ỉ n h 4 b ) . N h ư v ậ y d u n g d ị o h M C T I - IV chira á ò n g nh á t c ò n l an oẩc p r o t e i n k h á c k h ô n g có h oạ t tinh. N g o à i ra, k ế t q u ả đ i ệ n đ i cQng c h ử n g tỏ MCTI - IV c ó ti nh k i ề m m ạ n h , ẻr pH 8,3 n ó ĩ ầ n tícb đ i ệ n d ư ơ n g .
T i n h ««cli M C T I — I I C q u « e ộ t S e p k a d e x G - 7 5 :
D u n g ( ị c h M C T I — IV n h ậ n đ ư ợ c t ừ c ộ t S P - S e p h a d c x c — 2Ĩ) d c m c ò d ặ c , đ i ề u c h i n h p H đ ổ n 7 , 0 Tà c h o q a a CỘI s - S e p b a d e x G - 7 5 . H i n h ị c h o Ihấy c ó 2 đ ì n h p r o t e i n n h u n g h o ạ t d ộ k i m h ã m t r i p x i n r h ỉ c ó ỏr d i n h p r o t e i n I h ứ II ( I I G ) ( h i n h 5) TỚi Vo = 177 m l . T i n h t h o o đ ồ thị chnftn ( h l n h 12) n ó c ỏ t r ọ n g l ư ợ n g p h f t n t ừ k h o ả n g 5.000 Đ a . Đ i ệ n đi t r ể n gel p o l i a c r i ỉ a m i t ( t ừ d ư ơ n g d ẽ n Ãm), mỗầ đ ỉ n h c h ỉ c h o 1 b a n g p r o t e i n đ ĩ n h p r o t e i n II ứ n g v ớ i b ă n g d i (HSng n h a n h , đ ỉ n h p r o t e i n I ứ n g v ớ i b * n g di <’ ộ n g c h ệ m cùa d u n g d ị c h MCT1 - IV Irirớc khi c h o q u a c ộ t S e p h e d e x G — 75 ( b i n h 4b).
S â c k ỷ ái l ự c q u a c ộ t t r i p x i n S e p k e r o z a 4 B :
D ồ n cúc phftn đ o ạ n c ủ a đ ĩ n h II G ( h l n h 5), c h o q u a c ột t r i p i i n - S e p h a r o / * 4 tì, h o ạ t đ ộ n g r i è n g c ù a d u n g d ị c h TI n h ậ n đ ư ợ c s a u khi s ắ c ký ải l ự c vồn kh ổ ng t ần g, t ì i ề u đó c h ứ n g tỏ II G c ỏ t h è đa đ ư ợ * tinh a»c h. Đ ỉ ệ n đ i t r ê n g e l p o l i a cr i la - ni i d d a n g d ị c h c h ấ t kìtn h ă m n h ậ n đ ư ợ • »au i ẳ c k ý Ai l ự c , thfly xuđt h i ệ n th êm 1 b ă n g p r o t e i n d i đ ộ n g c b ậ r n h ơ n (hi nl i 4 b , c ộ t H, bf t ng ru) t à c ũ n g c ó h o ạ t t i nh T I . Đó c ỏ t bồ là d ạ n g b i ộ a c h ĩ u h c&a NÍCTI — IV, kv h i ệ u ik M C r i - I N * . Dĩ Hg
ịtem
© I
H 1
•4 8
:
I h n h r,
Ị
S; n* k \ M( T I “ I V <ỊU;| CỘI s <‘ I ' h a < ! t ‘\ G — 7,‘>
\ l . i f n m ) r à n ỈK:ìn«ĩ v o i ( l u n g (ỉỊv*h ( l ộ m p h ỗ l p l i ủ t C. 06M J>Iĩ = 7, 0. T ố c l ỉ ậ
riiiiV ■ , thu mỏi |'h.,n <ỉo:m o 11)1. r ______p r o f e n : \ --- V h o ạ i (ĩ ộ
b b i é u c h ỉ n h l i u r ừ n g đ i r ợ c t ạ o t h à n h khi l i o n him!, she kỷ ủi l ự c 11. l r i p x i n (<>
t t h ế cut đ ứ t l i è n kết p e p l i t — Pi - P ’i — ư U u n g t â m p h ả n ÚDg c ủ a c h.í I k i m Lã 111 I r h ư v ầ n t h ư ò n g llũiy ử rốc. t r ư ờ n g liựịi k h á c I 3. (■). 8, ‘J. l e , 1-1
B ả n g 2: T ó m tất q n á t i ì n h t i n h s ạ c h M C I I — I \ c ù a Ỉ!,;i m ư ỏ p l i á i ì g
( lf>g liạt (lã nghiv'-n m ị n . ứ n g v á i 20(1 hạ l ) . '
. 1
( P r o t e i n
t o 11^ s o 1 (11**4) 1
; ỉ í o ạ t đ õ k i m h ã m I r i p x i n ( T Ỉ A) SỐ
T T
I
C à c b ư ớ c t i n h s a ch I I A
M/;ií> >ỗ
(1C)
■ 1 ỉ o a ! d ộ r i i ’Tl I I i n <4
p r o l e i n
! ' SỔ ! n U i ) h s ạ c h
i ỉ i ệ u
su;ì í
Ị Dịch chi t ' t till) b a n g 11 f - ỉ cỏ 1 1 l i s . l t •125 s 0.38 I.N Kí )
•)
x ử lý b ồ s ung.
Sắ c k)' (ịi;a cội Sl> - Sopi i a- (lex c — 25.
MC T I - 1 18 8 12,9 <),2íi 0.7 3,0
MC T I II 42, 7 57, 8 1 :\x> 13, (ỉ
MOTI - III 15. s 98, ã L\ 1 :> r>,7 23. 1
MCTỈ - IV 87.7 150. 2 1,1'5 ;j,:ỉ 'Xỉ ,1
MC I I - V Ki .2 2.8 0,17 0,1 0,7
3
T ô n g s ổ :
' Sc phacJ cx G - 75
2 11,2 35,7
31:8,2
1112,0 3,1.1 N,:ì
77.1 20.1
4
M C T I - IV.
T r i p x i n — S e p h a r o / a IU
MCT I - IV 2 3 . f i 1 7 i.5 3 . 1 7 • 8 , :ỉ 17.5
4 4 TC 4 9
ũ ' Vi, ” ĩôo' -50 ioư
T 1 ’ L t I m f )
C á c n g h i ê n c ứ u t r ư ớ c ve ÍJU' I I à h:i! bììu bí I 3. 6. 7, 9. \ ‘l Ị c ũ n g c h o t h á y d ạ n g h i ệ u c h ỉ n h g i ó n g với ( i ạng b a n đ à u VI ' n l i i e u tinli c h i ! nliir h o ạ t đ ọ , I r ọ n "
l ư ợ n g p h à n l ử v . v . . . N h ư n g có t h ê m 1 n h ó m — N U ; , 1 và 1 nh.Siii — (. 00- l ự (lo. Vi y ậ v t ù y ])II c ủ a m ồ i I r i r ờ n q , n ỏ sf' t ich đ i ệ n à m h o ặ c d ơ ơ i i t í l ớ n h ơ n (lạng b a n (lau. N í u c h á t k i m h ã m c ỏ I r ọ n g l ư ự n g p l i à n t ử
t h í n , sir s ai k h ủ c I à y t h è h i ệ n r õ ’ ột khi d : ộ n đi Mặt k h á c , vi d ạ n g h i ộ u c h i n h cỏ > l iên kế! t r o n g
p h ù n t ừ bị cốt (lirt n é n c; ún<! có t h ề ké: n b è n h ơ n d ạ n g b a n đ â u . VI v ậ y . dul l }’ d ị c h có c h ử a d ạ n g biộti c h ỉ n h sò c ó đ ộ bi n v ớ i n h i ệ t i hì í p h o n đ u n g d ị c h k h ô n g c ố n ỏ .
Đ ộ b è n v ờ i n h i ệ t ' t ủ a I V I C T l - I V I r i r ờo v à s a u k i ll q u a c ộ t t r i p x i n — S e p h a r o f a ‘1 B :
Cá c I i g h i é n ^ ứ u s ư bộ c h o t h á y M C I I - IV k h á lu-n với n h i ệ l . d o (ló đ ã l i ến h à n h n g h i ê n c ử u đ ỏ t)(‘P. b ằ n j i c á c h x ử l ý d u n g d ị c h eluit k i m h ã m (>
1I:0°C s a u c á c k h o ả n , " t h ờ i g i a n xác đ ị n h l á y !1 â u l ã m l ạ n h n h a n h c h ỏ c g v à x a c d ị n l i h o ạ d ộ k i m h ã m c ù a n ỏ . B ả n g 3 c b o Llìấy d u n g ả ì c h MCT1 - IV n b ậ n đ ư ợ c s a u k h i q u a c ột t r i p x m — Sepl i arozi * IB ờ lát c ả c á c t h ờ i đ i ề m l á v p h â n t í ch (lĩ'ii có lio*t đ ộ t há p h ư n d u n g d ị c h I r ư ở c khi q u a cột s ắ c ký ái l ực . Đỏ c ũ n g là mộ t b ằ n g c h ứ n g về bự có m ặ t
c ủ a d ạ n g M C T I - I V*.
T r ọ n g l ư ọ r n g p h â n t ử c ủ a M ( . l 1 — IV :
n ù n g p h i r ơ n g p h á p s á c k ý q u a c ộ t S c p h a d e x G- 7 5 . đ o t h è l í ch r ú l . ’l ư a x à o đ ò thị c h u ằ n ở h ỉ n h 2 đ ă t i n h đ ư ợ c t r ọ n g l ư ợ i g p h â n t ử c ủ a MCTI - IV v à o k h o á n g 1.800 - 5.500. T r ọ D g l ư ự n g p h â n t ử cỉ i a M e n - IV s a u k h i di q u a c ộ t t r i p x i n — Se p t a e r o z a e ũ n g k h ô n g t h a y d ồi .
T í n h đ ặ c h i ệ n c ủ a MC Tl — IV
D ù n g p h i r ơ n g p h á p kl i uyểt r h t ản t r ê n đ ĩ a t h ạ c h có đ ộ n h ạ y r a o Ị 4 I d è n g h í è n c ư u anh h ỡ ừ n g cua MCTI - IV d é n h o ạ t đ ộ phân £>iài p r o t e i n CÙI các prot- e i n a z a k h á c n h a u c h o I h ẫ y u ó k h ô n g k ì m h ã m 1 - k i m o t n p x i r . ( ù n g k h ô n g k i m h i m p r o l o i n a z a n g o ạ i b à o c ủ a rtacilli.s p u m i l u s và l ) r o i r , e l a i n T u v n l i ũ n , tli co t h ô n g h á o ml ị - ng c ủ a T r a n I.iỏi) H ư a r g MCT I - IV lại k ì m h à m h o ạ t độ p h a n g i ả i g e l a l i n c ủ a |>roteina/.a c ó ti-ong m ò i í r t r ò n g I.uôi o ã y T r i c h o p h y t o n r u b r u n
CA • k é t q u ả n g h i ê n c ứ u t i v n c h o t h á y MC I 1 — IV, cliăt k i m h ă m r h u y ế u của h a Ị , m r ớ p i a n g có t r ọ n g l ư ợ n g p h à n t ừ t h í p h a l l C P P T I - II ( M r = 7:,00) [ 8 | ĩ i h ư n g l ớ n h ư n t át c ấ c á c TI c h u y ế u c ù a h ạ t h a u bi đ ã bi ế t ( Mr = 32(10) Ị 2, 3, 6.
8 0 12]. T u y n h i ê n k h á c v ờ i cúc TI ke t r ò n . M C ĩ l — IV co t í n h ki m c a o, k h i d i ệ n (li (X p l i 8.3 n o v ẫ n (li c h u y ề n VC c a t ổ t . T í n h c h á t n à y cfiDg ilã q u a n s át <!irựj ả C P P l ỉ - I I I c ủ a h ạ t O u c u r b i l a p e p o v a r . pat i s s o r . i n a [9], C P P l ' l —II c-ủã h ạ t C u c u r b i t a p e p o var. ( i n o i u u n t i a [ 3 ] , TI c ù a h ạ t ỉ i r ạs s i ea o ĩ e r a c e a v a r . S a b e l l i c a I m Ị. n h i r n g các TI n ã y cĩfu c ó ( r ọ n g l u ợ n g I b â n t ứ H ả n g .‘i : I) ộ 1 ) 0u với n k - ệ t
c ủ a đ u n g d ị c h MCTI — IV t r ư ò c (a ) v à s a u ( b) klì i q u a c ộ t i ĩ i p x i n - s è p h a -
r o z a 413 ( x ử lý ỉr 100°C) T h ờ i
g i a n TI A c ò n lại (% ) l ử lý
( p h ú t ) a
1 h _ ỉ
0 100 100
93 71 ị
IV) 91 30 1
00 91 :sã j
Ị 120 75 35
1 150 75 27
1 180 r>i 27
240 :,1 27
300 1
10 10 Ị
:
li >n M C T I - IV. Do <10 MCT1 — IV r o [he la m n t I I rnứi c ủ a họ ỉ i âu bí, k h á TW i c á c I J đ ù bi«'t. Mặt k h á c , lác (ỉ ng kỉiiì h à m p r o N i n a x 1 T r i c h o ; ) h vloiì r u b r u m (TU a MCTI — IV đ á n g đirực hru Ỷ t i ế p tực n g h i r n c ử u vì n ó c ố t he c ó V n g h í a t rroDí Ị f h ự c l e y 1)ỌC.
TẢI L I Ệ U T H A M K H Ả O
1. D a v i s I U . , 1964: Ann N . v . A c a i . S c i . , 121 : 104 - 427.
2. H o j i m a Y.. J . v . P i e r c e . J . J . P i s a n o . 1 9 8 2 : B i o c h e m i s t r y 111 : 37-11 — iw Hi.
:>. L e l u k J.. J., O t l e w s k i , M . W k c z o r e k , A . P o h m o w s k i T . W i l u s z , 1(j8 3 : Ac t a B i i o h i m . P o l o n . a i ) : 1 2 7 - 1 3 8 .
I L e i u k .1.. P h ạ m T r à n C h â u , J . K i e l e c z a w a 19<sf); XXI Z j a z d P I B i o c h K i r a i v O W s t r e s z e z e n i e , t r . l 3 i ) .
'). L o w r y O . H „ N.J. R o s e b r o u g h , A . c . F a r r , H. . [. HandaI l 19.11 : J. Bi ol , C h o m U 9 ' 3 : 2 6 5 — 2 7 5 .
6 o i e w s k i J. , A . P o i a n o w s k i , . I. Lel uk. T . W i l u s z , 1981 : \ 'fu Ri()‘*hia]. F o l o n 331 : 267 - 2 7 8 .
7. O l l e w s k i .1., T . W i l u s z , 198,'): Ac t a B i o e l n m . P o l o n . , .' 2: 2*5 -
(S. P h ạ m T r â n Cluui, Ỉ . L e l u Ỉ . Willis/., A . P o I a n o w s k : , 198/): Act a M' oc hi t n.
I ° o ) o n , ; ì 2 : a i 9 — 3 2 8 .
9. P h ạ m T r á n C h a u . 1980: . V i a I ' m v e r s i a i i s W r a ' i s l a v h : sis N ° 9 1 - \ 10. IMiạ.ii Tr ul l c . i à u , J . Li ' I u k, 19 8 7 : ỉ ạ | ) chi sini: học*. 1-7.
11. i ’i i a u T u ả n Xg h i u , i'ih; hì Ỉ rail Ch â u , r, N7 : T;;ịM*hi Siiìii !;ọv‘, 1Í (.’5) ( l a n^ ill.
1-. P o l a n o w ski A , T. \ Yi !u-. z, B . X i c n a lie) \ v! t v, i;. L i e s ' ỉa I*, A.Nl<)inin\ska, Kv. N o w a k 1 0St»: A d a BiOi' hijn. P o l o n . '11: .‘*>71— 382.
l.‘>. W i l i m o w s k a — JVIo A.. 198,'). Act a n ooi'iim. p o l o n . r*2 : 3 r> 1 —
M r i e r p o n a I I . c . M. M. Bj i hl uo HdiiTC., 1 9 0 0 : ripuK. :i!;t IS no X n M. II MiiKpoomV!
2 ! : 2 3 2 - 2 3 8
<J'4>íaiỉ T y a n H n i f l , 0 a M Man May
O M I I C I K A II 4 AC 11 m i l AM X A P A K i ' T: ì MỈ CI I Ỉ :: A i Y I A i m o : I K i n i l i l l Y O I W r P I i r i C H H A 113 CKMMM M O M O I i D i :a C H A H A M ỈA L.
O ' l i i i U c H OAIIH IYI u IỈ HOC. li i m r n G i J T o p i p u n c m i d , M C Ỉ Ỉ - I V Ỉ U Ỉ Í C i ' j KCT p a K' r a c*e MHH M o m ) f d i c a c h a n u i i i a n o m * ) j NKUHor i x p O M í ì T o r p I<í);;fỉ II ^ c r i - c e < | n i / : IIKCI: Co.
I I ; r c ; i b 4 > i ! . ' i i > T p J u i i i ! n a c c ộ a A e K c c ( i 75. I l n n i f M i T O p i i n j H C T Cn TC. p Mo c Ta ổ l i . ỉ LHb i M, i m n . i o m i u M n o.1 í ĩ Her r ni AOM c i ni 3: v*oMo; i eK\ vi H| ) HUM, BCCOM. M . ' C J I - - I Y lie m i n i - 0 HI p y c T Ka i ; a - x i i M O T p n n c i n i a , nHCmHOKVICTOqI! bix npOTUi Ki i 3 L> i c i l i i i s p u n n l u s , TâK
M ỉ f i pOMO. /ICM n a .
r L a n Tu mi Vghi a , P h a m T r a n C h a u
p u r i f i c a t i o n o f a m a j o r THYPS1X I N H I B I T O R F R O M
M I O M O M M C A C I I A R A N T I A R E S T I N G SKI*;DS a n d 1 i s SOM I. P I l O P K f U IKS A m a j o r t r y p s i n i nhi bi t r, MCT I IV, w a s i s o l a t e d ÍỈOỈÌI !!. IỈCỈ o x l i a c t o f M l o í i ì o r d i c a c h a r u n l i a r e s t i n g s e e d s b y u s i n g c o l u m n c h r o m a t o g r a p h y o n Sp — s >e p h a d e x C - 2 5 a n d g e l f i l t r a t i o n o n S e p l i a d e x ( r — 75, i: i i j ) p e n r s ÍÓ b e a h e a t stta^ble a l k i i i n e l o w m o l c ^ u l e r ĩ: a s s p o l y p e p t i d e . T h e i ĩ i h i b i t o r d o c s n o t a ct o n c l h j m o t r i | ) s i n , e x t r a c e l l u l a r pr >teinast*s o f B a c i l l u s puIIIilUS or b r o m e l a i n .
Bi ộ m ô 1 S i n h h ỏ a —K h o a Si nh h ọ c
T . V ư ở n g Dạ i h ọ c T ò n g h ợ p Hà Nội Nl i ậo hài TI . à y 2H-6*-87.
